维普资讯 http://www.cqvip.com ・３２・ 西医结合肾病杂志２００７年１月笠璺鲞筮 塑 ！］［！ ：』 受 ２ ！： ： Ｑ： 肾茶对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制研究 刘广建① 黄荣桂①△ 郑兴中① 陈锦海① 李月婷① （摘要］ 目的：观察肾茶对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及探讨其可能的作用机制。方法：采用ＳＴＺ注射法制作ＤＮ大 鼠模型，随机分为正常对照组、糖尿病对照组、肾荼小剂量治疗组（２ ｇ／ｋｇ）、肾荼大剂量治疗组（８ ｇ／ｋｇ）。灌胃给药８用后，分 别测定血糖、２４ ｈ尿蛋白排泄率、肾小球滤过率、肾组织脂质过氧化物和超氧化物歧化酶及肾皮质ＴＧＦ一岛、Ｃｏｌ—ＩＶ、ＦＮ的 表达。所采用的技术包括生化、分光光度法、放射免疫、免疫组化、光学显微镜及电镜超微结构等。结果：肾荼小剂量与大剂 量治疗组大鼠的２４ ｈ ＵＡＥＲ、肾小球滤过率、肾重／体重指数及肾组织ＭＤＡ均显著低于ＤＭ对照组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）； 而组织Ｓ０Ｄ活性显著高于ＤＭ对照组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）；肾茶８ ｇ／ｋｇ剂量治疗组大鼠肾皮质ＴＧＦ一岛、ＦＮ、Ｃｏｌ—ＩＶ的 表达显著低于糖尿病对照组（Ｐ＜０．０５）；肾茶治疗组大鼠治疗前后血糖比较及与糖尿病对照组比较均无统计学差异（Ｐ＞ ０．０５）。结论：肾茶水煎剂对ＳＴＺ糖尿病大鼠肾脏的保护机制与改善氧化应激、抗炎及抑制系膜细胞增生有关。 ［关键词］ 肾茶糖尿病肾病大鼠氧化应激抗炎 糖尿病肾病（ＤＮ）为糖尿病患者的主要慢性并发症，而且 生物公司提供。 已成为导致终末期肾衰竭的重要原因之一。ＤＮ发病机制复 １．４主要仪器ＧＦ一２３４Ａ型生化超微量自动分析仪（高 杂，其中涉及糖代谢紊乱、肾脏血流动力学改变，多种细胞因子 密仪器厂），ＳＮ６９５型智能放免７测量仪（上海核福光电仪器有 及遗传背景等。目前国内外研究认为，多种细胞因子分泌增多 限公司），Ｂｅｃｋｍａｎ自动生化仪，大鼠金属代谢笼（苏州动物仪 和细胞外基质（ＥＣＭ）蛋白代谢异常，在ＤＮ发病机制的各个环 器厂），透射电子显微镜（福建医科大学电镜室）。 节起着重要的作用。ＤＮ肾脏系膜细胞转化生长因子岛（ＴＧＦ 一 ２实验方法 ）合成增加，基本已成定论。并且认为糖尿病早期肾小球 ２．１糖尿病大鼠模型的制备取ＳＤ大鼠４０只，适应性 肥大是ＴＧＦ一岛所介导的＿１ Ｊ。肾茶（Ｃ．Ｓｐｉｃａｔｕｓ）又名猫须草， 饲养１周后，按５５ ｍｇ／ｋｇ体重腹腔注射２％的枸橼酸钠缓冲液 主产广西、广东、云南、福建、台湾等地，其主要活性成分有迷迭 （ｐＨ值４．２）在低温下配制的ＳＴＺ。７２ ｈ后，经尾静脉采血测血 香酸（ｒ￣ｍｒｉｎｉｃ ａｃｉｄ，ＲｓＡ）、熊果酸、黄酮类和肌醇等。肾茶的 糖，代谢笼收集尿液测尿糖。如达到下列条件即认为糖尿病动 药理作用主要为抗炎、免疫调节、抗氧化、抗凝、抗感染、利尿 物模型成立，列入研究观察对象：（１）随机血糖≥１６．７ ｍｍｏｌ／Ｌ： 等，其作用与其所含活性成分ＲｓＡ、熊果酸、黄酮、肌醇等有关。 （２）尿糖强阳性。 近年来有应用单味肾茶及其复方制剂治疗尿路感染［ 、尿路结 茶对早期糖尿病肾病是否有保护作用，以期为中西医结合防治 早期糖尿病肾病提供实验依据。 材料与方法 １实验材料 ２．２动物分组将预留的８只大鼠设为正常对照组；并 石ｌ３Ｊ、肾病综合征ｌ４Ｊ及肾衰竭【 Ｊ等临床报道。本实验拟探讨肾 选３０只成模大鼠随机分为糖尿病对照组、肾茶小剂量治疗组、 肾茶大剂量治疗组，每组各１０只。 ２．３给药途径肾茶大、小剂量治疗组，分别按生药８．０、 ２．０ ｇ・ｋｇ－１・ｄ－１灌胃；糖尿病对照组及正常对照组给予等体积 蒸馏水灌胃。以上各组均连续给药８周。各组均自由取食，自 由饮水。 １．１实验动物清洁级雄性ＳＤ大鼠４８只，体重１８０～ ３主要观察指标（１）精神状态、饮食、毛色、体重（每周 ２００ ｇ，由上海西普尔一必凯实验动物有限公司提供，动物许可 测１次）。（２）每４周测血糖１次。（３）治疗８周后，所有大鼠 证号：ＳＣ）（Ｉ（Ｃ（沪）２００３—０００２。 收集２４ ｈ尿液，放免法测定尿微量白蛋白排泄率，苦味酸法测 １．２实验药物肾茶购自泉州市医药分公司，产地福建 定尿肌酐。以戊巴比妥钠４０ ｍｇ／ｋｇ麻醉下心脏采血测血肌 同安。取肾茶粗粉１５０ ｇ加蒸馏水１０倍量，浸泡１ ｈ后，在 酐，取肾称重后断头处死。测定肾小球滤过率［采用内生肌酐 ７０℃水浴提取２ ｈ后，滤过，滤液于旋转蒸发器减压浓缩制成 清除率（Ｃｃｒ）公式计算］。测定肾重／体重比，得出肾重／体重指 大剂量每毫升相当于１ ｇ生药，小剂量每毫升相当于０．２５ ｇ生 数（肾重／体重比值×１ ０００）。（４）所取大鼠右肾１／４用玻璃匀 药的肾茶提取液供用。 浆器匀浆，测定肾组织超氧化物歧化酶（Ｓ０Ｄ）、丙二醛（ＭＤＡ）。 链脲佐菌素（ＳＴＺ）由美国Ｓｉｇｍａ公司提 Ｏ）ＳＯＤ测定采用黄嘌呤氧化酶法，取１０ 肾组织匀浆参照测 供，尿白蛋白放免试剂盒由中科院原子能科学研究所提供， 试盒说明书具体步骤进行。②ＭＤＡ测试盒原理：采用硫代巴 １．３主要试剂ＳＯＤ及ＭＤＡ试剂盒由南京建成生物公司提供，兔抗ＴＧＦ一 、 比妥酸（ＴＢＡ）缩合法，测定时参照测试盒说明书具体步骤进 ＦＮ，小鼠抗Ｃｏｌ—ＩＶ单克隆抗体及ＳＡＢＣ试剂盒由武汉博士德 行。（５）取左肾皮质以１０％福尔马林固定、脱水、浸蜡包埋备 ①通讯作者 △福建蜃科大学附属第二医院肾内科（泉州３６２０００） 维普资讯 http://www.cqvip.com ２００７年１月第８卷第１期ＣＪＩＴＷＮ 』塑塑 Ｑ ！ ： ： ： ・３３・ 用，制３ １厚切片行ＰＡＳ染色、ＰＡＳＭ染色观察肾单位形态及 病变程度。 表２治疗８周后各组ＧＦＲ、ＵＡＥＲ、 肾重／体重指数比较（ ±ｓ） 温 Ⅱ８４ ｌｉｎ以灭活内源性过氧化氢酶，萎 Ａ高高压抗原修复 ．７．压ｋ，３抗％原ＨｚＯ修２＇复￣竺： （ ： ：！： ： ２ １ ２ 二 温（ＴＧＦ一８ｌ、Ｃｏｌ—ＩＶ），酶消化抗原修复（ＦＮ）；滴加正常山羊血 正常组 ８ ３．７２±Ｏ・ ３・６７±Ｏ・４９ ・１０±Ｏ・１７ 清封闭矗，室温２０ ｎ１ｉｎ后分另ＪＩ’滴力口兔抗ＴＧＦ一 ．２０ｏ）、兔 抗ＦＮ（１：１００）、小鼠抗大鼠Ｃｏｌ—ＩＶ单克隆抗体（１：１５０），４℃ ・ ｊ量组．篡 ：： ２蚴３．０５ ＿＋２．５３…＂＂ １１５３． ４４＿＋１ ．０７＂＂… ８ ４９７＋＿０．２５ ＊＃＃ ，１７６５＋＿１．７６－＊＃＃１２５３＋＿０．９１・・＃＃ ．．冰箱过夜；分别滴加生物素化羊抗兔ＩｇＧ（ＴＧＦ—ｐ１、ＦＮ），生物 ２０ ｍ．ｎ；滴加ＤＡＢ试剂，室温显色，镜下控制反应时间；苏木素 注：与正常组比较～Ｐ＜０．０１；与糖尿病组比较， Ｐ＜ｏ．∞，＃ Ｐ＜ｏ．０１；与肾 素化羊抗小鼠ＩｇＧ，３７℃２０ ｒａｉｎ；滴加试剂ＳＡＢＣ，３７℃ 茶／ｊ 比较Ｐ＜Ｏ．０１ ， ３肾匀浆ＳＯＤ和ＭＤＡ测定治疗８周后肾茶各剂量治 ．轻度复染，脱水透明封片，显微镜观察。以上各步骤滴加抗体 疗组肾ＭＤＡ显著低于ＤＭ对照组（Ｐ＜０Ｏ１），肾茶大剂量组 前，均以ＰＢＳ液洗片５ ｍｉｔｔｘ ３次。实验均同时采用 ｊｓ代替第 与肾茶小剂量组比较（Ｐ＜００１）。治疗８周后肾茶各剂量治疗 ．抗体方法作为阴性对照。结果在高倍镜（×２００）下随机选择 组肾ｓ０Ｄ显著低于ＤＭ对照组（Ｐ＜００１），肾茶大剂量组与肾 ２０个肾小球和２０个视野肾小管一间质，根据染色面积和强度 茶小剂量组比较（Ｐ＜０ｏ５）。见表３。 一．．按下列方法进行半定量评分：染色强度标准：基本不着色者 表３治疗８周后各组肾组织匀浆ＭＤＡ、 ０分，着色淡者１分，适中者２分，深者３分；染色面积标准：０： ＳＯＤ活性比较组别 （ ±ｓ） 无染色或微弱染色，１：染色面积＜２５％，２：染色面积在２５％～５ｏ％Ｚ￣，３：染色面积在５０％～７５％之间，４：染色面积＞７５％； ——＝＝＿＝＝『———————１ —————— （ｎｒｎ０１． 一１．ｐｒ０ｔ一 ） 一 （ｕ．Ｈ１ｇ一１．ｐｒ０ｔ一 ） 将染色强度与染色面积得分相加，总得分０为０，总得分１～ ２为１，总得分３～４为２，总得分５～６为３，总得分７为４。 ５统计学方法采用ＳＩ：Ｘ３Ｓ １１．０医学统计软件进行方差 ———— —— 糖尿病组肾茶小剂量组８ ８ ———— 茳 一９．７４＋－１．０４— １３．９０±２．００一 ２．５５±Ｏ．１８— ２・１１－＋０．１６一 分析。所有计量资料数据结果采用（ ± ）表示，免疫组化染色 采用半定量统计，评分方法见上述。 结 ｌ血糖测定果 查 塑墼 ｊ＿—ｊ 旦 —』 旦 ＿△ 注：与正常组比较， Ｐ＜Ｏ・０５，一Ｐ＜Ｏ・Ｏ ；与糖尿病组比较， Ｐ＜０．０５，＃ Ｐ＜０．０１；与肾茶小剂量组比较． Ｐ＜０．０５， Ｐ＜０．０１ ４肾脏病理学观察 ４・１ 及ＰＡＳＭ染色镜下观察 与正常对照组相比 治疗前后ＤＭ对照组大鼠血糖较正常对照 组显著升高（Ｐ＜０．０１），肾茶各剂量治疗组血糖与ＤＭ对照组 ＤＭ对照组光学显微镜下见系膜区增宽、系膜增生宽度大于毛 无统计学差异（Ｐ＞０．０５）。治疗后肾茶治疗组血糖与治疗前 细血管直径、呈弥漫团状分布，系膜基质、系膜细胞增生，肾小 自身对照亦无统计学差异（Ｐ＞０．ｏ５）。见表１。 表１各组治疗前后血糖变化情况（ ±ｓ，眦ｎ０ｌ／Ｌ） 管上皮细胞肥 ，肾茶大剂量治疗组较ＤＭ对照组病变明显 改香。 图 、图厶 ——虿 —— ■——百鬲———— ——— — — ———— 鬲一 三 — ｉ。 一融在正常对照组主要在集合管、远端小管、近端小管细胞浆 表达，而肾小球系膜区表达较少；在ＤＭ对照组，ＴＧＦ—ｐｌ表达 ４２ 皮璺ＴＧＦ一 Ｆ、Ｎ、ｃ０ｌ一Ⅳ．免疫组化测定ＴＧＦ ‘．糖尿病组８ ２３．３５－＿２４．０２—２４．７３－＿２３．３１—２５．２４±３．５４ 肾茶小剂量组８ ２２．９０±３．７７—２３．２６±３．８３—２３．３５±３－９２一 ．明显增ＪＪＩ（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）；在肾茶大剂量治疗组上述明显增加的表 堡茎 型墨望 ：垄圭 ：！！：： ：箜圭 ：变：：丝：墼圭！： ： 达受到明显抑制（Ｐ＜０．０５）。正常对照组肾小球、肾小管基底 膜有ＦＮ、ＩＶ型胶原表达，肾小球系膜区亦有少量ＦＮ、Ⅳ型胶原 ｔ－Ｉ：：与正静咀比较， －Ｐ＜Ｏ．０１ ２ ＧＦＲ、ＵＡＥＲ、肾重／体重指数＜０．ｏ５）。见表２。肾茶治疗８周后各治疗 表达；在ＤＭ对照组，这些成分表达明显增ＪＪＩ（Ｐ＜０．０１）；在肾 ０．ｏ５）。见表４、图３～图５。 组ＧＦＲ、ＵＡＥＲ、肾重／体重指数均显著低于ＤＭ对照组（Ｐ均 茶大剂量治疗组上述明显增加的表达受到明显抑制（Ｐ＜ 表４治疗８周后各组肾皮质ＴＧＦ—Ｂ１、ＦＮ、Ｃ０ｌ一Ⅳ表达活性比较（ｊ±ｓ） 注：与正常组比较， Ｐ＜０．０５，一Ｐ＜０．０１；与糖尿病组比较． Ｐ＜０．０５ ４．３超微结构观察在透射电镜下放大４ ８００倍后观察 倒伏融合成团块，系膜细胞增多，基质增多，基底膜明显增厚。 肾脏组织超微结构，可以看到ＤＭ组肾小球滤过膜结构明显异 正常对照组内皮细胞排列整齐，足突细长整齐，基底膜厚度适 常，内皮细胞排列紊乱、脱落，完整性被破坏，足突增粗、弯曲、 中。肾茶大剂量治疗组肾小球滤过膜结构有损害，但与未治疗 维普资讯 http://www.cqvip.com ・３４・ 西医结合肾病杂志２００７ 筮 鲞筮 塑 匹 Ｉ塑塑 ２ Ｚ： ！： ： ： 组相比有所改善。见图６。 讨 论 文认为剂量为２－－８ ｇ／ｋｇ的肾茶煎剂对ＤＮ具有降低尿白蛋白 排泄率、降低肾组织ＭＤＡ、提高肾组织ＳＯＤ活性、改善肾小球高 滤过状态、抑制肾组织增生等保护作用，剂量为８ ｇ／ｋｇ的肾茶煎 外基质增生的作用。 参考抑制细胞 ＤＭ对照组与正常对照组相比，２４ ｈ尿白蛋白排泄率及 剂有抑制ＤＭ大鼠肾皮质ＴＧＦ一既、ＦＮ、Ｃｏｌ一Ⅳ表达，ＧＦＲ显著升高，病理观察有肾小球基底膜增厚、系膜区增宽、系 膜基质增生、肾小管上皮细胞肥大等特征，具有典型早期ＤＮ表 现。肾皮质免疫组化提示肾小球系膜区ＴＧＦ一陆、ＦＮ、Ｃｏｌ一１Ｖ表 后所诱发的ＥＣＭ增生参与了ＤＮ肾单位纤维化的过程。与糖 ｔｈｅ ｎ．ａｎ 。ｎＴ ｎｇ罂 （本文图见插页１—１、１—２） 文献 ｇｔｓｉｅａｓ—ｄｄａ Ｃｒｕｚ ＭＣ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｋ ｒｏｌｅ ｏｆ 达增强并且肾小管及间质病变同样明显，证实ＴＧＦ—Ｂ１活化 １．Ｃｈｅｎ Ｓ，Ｈａｎｇ ＳＷ，Ｉｆａｃｔｏｒ—ｂｅｔａ ｓｙｓｔｅｍ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｄ ｍｅｓｉＳ ｏｆ 尿病对照组相比，肾茶小剂量及大剂量治疗组２４ ｈ尿白蛋白 排泄率、ＧＦＲ及肾重／体重指数明显降低，肾茶大剂量治疗组肾 皮质ＴＧＦ一岛、ＦＮ、Ｃｏｌ一Ⅳ的表达程度明显减轻，肾茶治疗前 后血糖水平无统计学差异。提示肾茶有降低早期糖尿病肾病 大鼠尿白蛋白排泄率及减少过高的ＧＦＲ、抑制肾组织增生、抑 制肾皮质ＴＧＦ一岛、ＦＮ、Ｃｏｌ一Ⅳ表达等保护作用，但无直接降 糖作用。肾茶保护作用的具体机制可能与抗氧化、抗炎、抑制 系膜细胞增殖有关。 实验中观察到ＤＭ组肾组织匀浆脂质过氧化产物ＭＤＡ活 性明显升高，抗氧化酶ＳＯＤ活性明显降低，提示氧化损伤机制 在ＤＮ的发生发展中起了重要作用。经肾茶治疗８周后，治疗 组大鼠肾组织匀浆ＭＤＡ显著低于ＤＭ对照组，抗氧化酶ＳＯＤ 活性显著高于ＤＭ对照组，提示肾茶能有效地抑制脂质过氧化 产物ＭＤＡ的产生，并提高抗氧化酶ＳＯＤ的活性，抑制ＤＮ的 氧化损伤过程。推测其抗氧化作用与迷迭香酸及熊果酸有关。 Ｋｅｌｍ等ｔ６］报道ＲｓＡ在１０ ｍｍｏｌ／Ｌ浓度时即有较强的抗氧化活 性。陈淑珍等Ｌ７ Ｊ报道ＲｓＡ能抑制大鼠中性粒细胞超氧阴离子 和过氧化氢以及脂质过氧化产物丙二醛ＭＤＡ的产生，还能减 少溶菌酶及ｐ一葡萄糖醛酸苷酶的释放，结果表明ＲｓＡ能抑制 中性粒细胞呼吸爆发和脂质过氧化及通过降低细胞内钙离子 浓度而抑制溶酶体的释放。Ａｎｄｒｉｋｏｐｏｕｌｏｓ等ＩｓＪ报道在１０～ ２０ ｍｍｏｌ／Ｌ浓度时，熊果酸对铜离子介导的低密度脂蛋白 （ＬＰＬ）抗氧化保护活性为５０．５％。Ｓｏｍｏｖａ等［ ］报道熊果酸对 盐敏感性遗传高血压伴胰岛素抵抗性大鼠有降压、减轻动脉硬 化及改善胰岛素抵抗作用，认为其抗氧化作用为机制之一。 ＤＮ中作为炎症介质的上游因子ＮＦ—ＪｃＢ激活后所产生的 炎症细胞因子如ＴＮＦ一口、ＭＣＰ一１、ＩＣＡＭ一１、ＩＬ一１等，同时 参与了发病环节【ｌ０ 。系膜细胞作为ＤＮ发病的靶细胞之 一，能产生多种细胞外基质，参与肾小球基底膜的修复与更新， 同时也参与肾小球炎症反应［１２］。ＲｓＡ和熊果酸均能通过抑制 ５一脂氧酶和环氧化酶阻断花生四烯酸代谢，而ＲｓＡ还有抑制 转化酶阻断补体激活的经典途径和旁路途径【１３］，以及抑制 炎症介质上游因子ＮＦ一・ 及炎症细胞因子ＩＬ一１、ＭＣＰ一１、 ＴＮＦ一０ｔ的作用。已有ＲｓＡ体外抑制鼠类系膜细胞增殖作用 的报道ｕ引，近来体外实验证实５０－－２５０ ｇｇ／ｍｌ剂量范围的肾茶 煎剂能够抑制脂多糖诱导的大鼠系膜细胞增殖及系膜细胞分 泌白细胞介素融且对系膜细胞无毒性作用ｆｌ 。在本实验中， 大剂量肾茶治疗组大鼠肾脏皮质系膜细胞肥厚增殖及细胞外 基质增生程度较ＤＭ对照组明显改善，故我们推测抗炎及抑制 系膜细胞增生亦为肾茶治疗改善ＤＮ肾脏病理机制之一。本 ｄｉａｂｅｔｉｃ ｎｅｐｈｒｏｌ￣ｔｈｙ．Ｒｅｎａｌ Ｆａｉｌ，２００１，２３：４７１—４８１． ２．黄荣桂．肾茶治疗血尿的临床研究．中国综合医学，１９９４， （２）：２８８—２８９． ３．黄荣桂，沈文通，郑兴中，等．肾茶对尿路结石的治疗作用．福 建医科大学学报，１９９９，３３（４）：４０２—４０５． ４．黄彬．肾茶合泼尼松治疗肾病综合征３３例临床观察．中国中 西医结合急救杂志，１９９９，６（１２）：５５０—５５１． ５．黄昆明．肾茶治疗多囊肾慢性肾功能不全的临床应用．疾病 控制杂志，２０００，４（１）：１９． ６．Ｋｅｌｍ ＭＡ，Ｎａｉｒ ＭＧ，Ｓｔｒａｓｂｕｒｇ ＧＭ，ｅｔ ａ１．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｎｄ ｃｙ— ｃｌｏｏｘｙｇｅｎｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｆｒｏｍ Ｏｃｉｍｕｍ Ｎａｎ— ｔｕｒｎ Ｌｉｎｎ．Ｐｈｙｔｏｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０００，７（１）：７—１３． ７．陈淑珍，付阳平，吴若．迷迭香酸对大鼠中性粒细胞自由基生 成和溶酶体酶的影响．药学学报，１９９９，３４（１２）：８８１—８８５． ８．Ａｎｄｒｉｋｏｐｏｕｌｃ￣ＮＫ，Ｋａｌｉｏｒａ Ａ，Ａｓｓｉｍｏｐｏｕｌｏｕ ＡＮ，ｅｔ １ａ．Ｉｎｈｉｂｉｔｏ— ｒｙ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｍｉｎｏｒ Ｐｏｌｙｐｈｅｎｎｏｌｉｃ ａｎｄ ｎｏｎｐｈｅｎｏｌｉｃ ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ ｏｆ ｏｌｉｖｅ ｏｉｌ ａｇａｉｓｎｔ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｌｏｗ—ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｏｐｐｒｏｔｅｉｎ ｏｘｉｄａｔｉｏｎ．Ｊ ＭｅｄＦｃｘｘｔ，２００２，５（１）：１—７． ９．￣ｏｎ３ｏｖａ ＬＩ，Ｓｌｉｄｅ ＦＯ，Ｒａｍｎａｍｎ Ｐ，ｅｔ ａ１．Ａｎｔｉｈｙｌｘ￣ｅｎｓｉｖｅ．ａｎ— ｄａｔｈｅｒ￣ｅｒｏｔｉｃ ａｎｄ ｎａｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｉｖｔｙ ｆｏ ｔｒｉｔｅｒｐｅｍｉｓｄ ｉｓｌａｔｅｄ｛ｔｕｒｎ ｏｌｅａ ｅｔｌｌ＇ｏｐａｌＢａ，ｓｕｂｓｐｅｃｉｅｓ ａｆｉｆｃ￣ｍｎ ｌｅａｖｅｓ．Ｊ Ｅｔｈｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，２ｏ０３， ８４（２—３）：２９９—３０５． １０．Ｂａｎｄａ Ｎ，Ｎａｋａｍｕｒａ Ｔ，Ｍａｔｓｕｍｕｒａ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｒｅｌａｔｉｏｎ— ｓｈｉｐ ｏｆ ｍｏｎｏｃｙｔｅ ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｔａｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ——１ ｗｉｔｈ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ．Ｋｉｎｎｅｙ Ｉｎｔ，２０００，５８（２）：６８４—６９０． １１．Ｋａｔｏｓ Ｓ，Ｌｕｙｃｋｘ ＶＡ，Ｏｒｓ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｒｅｎｉｎ—ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｏｎ ｂｌｏｃｋ— ａｄｅ ｌｏｗｅｒｓ ＭＣＰ一１ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｒｅｔｓ．Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ． １９９９，５６（３）：１０３７—１０４８． １２．Ｓｅｄｏｒ ＪＲ，Ｋｏｎｉｅｅｚｋｏｗｓｋｉ Ｍ，Ｈｕａｎｇ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ，ｍｅｓａｎ一 西ａｌ ｃｅｌｌ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｎａｄ ｇｌｏｍｅｒｕｌｅｒ ｉｎｊｕｒｙ．Ｋｉｎｄｅｙ Ｉｎｔ，１９９３，３９ （Ｓｕｐｐ１）：￥６５一￥７０． １３．Ｐｅａｋｅ ＰＷ，ＰｕｓｓｅＵＢＡ，ＭａｒｔｙｎＰ．ｅｔ。ａ１．Ｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔｏｆ ｒ￣ｎａｒｉｎｉｃ ａｃｉｄ ｏｎ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ ｉｎｖｏｌｖｅｓ ｔｈｅ Ｃ５ ｃｏｎｖｅｒｔ＆ｓｅ．Ｉｎｔ ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，１９９１，１３（７）：８５３—８５７． １４．Ｍａｋｉｎｏ Ｔ，Ｏｎｏ Ｔ，Ｍｕｓｏ Ｅ。ｅｔ ａ１．Ｉｎｈｉｂｉｔｃｒｙ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｎ ｎ１ａｒｉｎｉｃ ａｄｄ ｏｎ ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｏｏｆ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｍｕｒｉｎｅ ｍｅｓａｎｇｉａｌ ｃａｌｌｓ．Ｎｅｐｈｒｄ Ｄｉａｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ，２０００．１５（８）：１１４０—１１４５． １５．李月婷，黄荣桂，郑兴中．肾茶对肾小球系膜细胞增殖及白 介素１一ｐ表达的影响．中国中西医结合肾病杂志，２００３，４ （１０）：５７１—５７３． （收稿：２００６—０９—３１） 维普资讯 http://www.cqvip.com 肾茶对糖屎病大鼠肾脏的保护 Ｔ隹用及其机制研究 见正立３２页 ： Ａ ｌ箭头所示部位为暴膜医Ｉ Ｂ ｃ箭头所示部位为系膜区｝ Ｃ｛箭头所示部位为系膜区 Ａ：正常对照组Ｂ：糖尿病对照组Ｃ：肾茶太剂量治疗组 圈１各组ＰＡＳ染色比较（×４００） Ｄ（箭头所示部位为基底膜）ｘ ２００ Ｅ（箭头所示部位为基底膜）×２００ Ｆ ｃ箭头所示部位为系膜区ｌ×４００ 插页１—１ 维普资讯 http://www.cqvip.com 肾茶对糖尿病大鼠肾脏的保护 １隹用及其机制研究 见正文３２页 ＿・－＝ －、： 一。、 一 ． ■． ０． ｜ 、 ～ ’坪 Ｍ Ｉ箭头所示部位为系胰区） Ｎ（箭头所示部位为系膜区）０ ｆ箭头所示部位为系膜区 Ｍ：正常对照组 Ｎ：糖尿病对照组０：肾茶大剂量治疗组 圈４各组ＦＮ免疫组化ＳＡＢＣ染色比较【×２００） 譬 ．～骞 ０ ∥ ｜．＿龟． ． ．． Ｊ ｆ箭头所示部位为系膜区） Ｋ ｆ箭头所示部位为系膜区）Ｌ（箭头所示部位为幕膜区 Ｊ：正常对照组围５各组（ ｏｌ—Ｉｖ免疫组化ＳＡＢＣ染色比较（×２００】 乳 Ｋ：糖尿病对照组－Ｊ肾茶大剂量治疗组 Ｐ ｆ箭头所示部位为基底膜】 ０【箭头所示部位为基底膜） Ｒ ｆ箭头所示部位为基底膜 Ｐ：正常对照组０：糖屎病对照组Ｒ：肾茶文剂量治疗组 图６各组电镜超微结构观察比较（ｘ４ ８００） 擂页１—２